Лабораторная диагностика — это совокупность методов, которые помогают анализировать различные биологический материал при помощи специального оборудования. Для выявления инфекций, передающихся половым путем, существует несколько эффективных методов. Самым точным и быстрым является ПЦР.
В отличие от бак посева, который проводится в течение недели, ПЦР помогает выявить возбудителя в тот же день. Кроме того, при помощи такого исследования возможно обнаружить даже скрытые и вялотекущие процессы, когда количество возбудителя в организме минимально. Рассмотрим, что такое ПЦР диагностика и как она осуществляется.
Содержание
Что такое ПЦР метод
Полимеразная цепная реакция или ПЦР — это метод исследования, который позволяет обнаружить нуклеиновые кислоты (ДНК) микроорганизмов, добиться повышения их концентрации в биологическом образце. Метод используется в медицине не только в качестве анализа на ЗППП, но и для установления отцовства, для диагностики наследственных патологий. Метод применяют и в экспериментальных целях для клонирования и выделения новых генов.
Метод ПЦР диагностики основан на возможности удвоения необходимого участка ДНК при помощи специальных ферментов.
Благодаря такому методу удается получить достаточный участок ДНК, чтобы подтвердить наличие того или иного микроорганизма. Таким образом, ПЦР помогает обнаружить даже скрытую инфекцию, если в образце присутствуют молекулы ее ДНК.
Особенно актуален метод полимеразной цепной реакции в венерологии, гинекологии и урологии для диагностики ИППП. Дело в том, что большинство инфекций развиваются медленно и никак себя не проявляют. Кроме того, их сложно обнаружить при помощи других исследований из-за недостаточной чувствительности. Особенно опасны вирусы, такие как ВПЧ (вирус папилломы человека), ВИЧ, гепатит, вирус герпеса которые могут приводить к инвалидности, смерти пациента, развитию онкологии.
Диагностика ИППП методом полимеразной цепной реакции помогает обнаружить единичные клетки микроорганизмов, что невозможно сделать при помощи микроскопического или бактериологического исследования. Также метод очень эффективен в диагностике внутриклеточных паразитов, например, хламидий.
Полимеразная цепная реакция показана пациентам, у которых можно заподозрить наличие инфекции, передающейся половым путем. Основные симптомы, которые могут выступать показанием к сдаче анализов:
- жжение, зуд в паху;
- покраснение наружных половых органов;
- появление выделений из влагалища или уретры с неприятным запахом.
Как правило, полимеразная цепная реакция показана, если пациент уже сдал ОАК и ОАМ, мазок из влагалища и уретры с микроскопическим и бактериологическим исследованием или ИФА (иммуноферментный анализ), а возбудителя выявить не удалось.
ПЦР используется не только для выявления ИППП, метод эффективен в отношении следующих инфекций:
- гарднереллез;
- сальмонеллез;
- цитомегаловирус;
- гепатиты;
- токсоплазмоз;
- краснуха;
- мононуклеоз и др.
Анализ на скрытые инфекции нужно сдать не только тем пациентам, которые уже испытали на себе симптомы заболевания, но и в качестве меры профилактики, если планируется беременность.
Полимеразная цепная реакция показан людям, которые ведут беспорядочную половую жизнь и могли заразиться ИППП.
Преимущества и недостатки ПЦР диагностики
Современные специалисты при выборе метода диагностики ИППП рекомендуют именно ПЦР. Преимущества метода:
- Полимеразная цепная реакция очень чувствительна. Микроорганизм будет обнаружен, даже если он находится в организме в единичных количествах.
- Метод позволяет точно определить микроорганизм по его ДНК.
- Для диагностики подойдет любая биологическая жидкость — кровь, моча, слюна и тд. ПЦР проводят даже для оценки качества почвы и воды.
- Диагностика выполняется очень быстро, результат можно получить через 3 часа после сдачи материала.
Существует у метода и одна особенность, которую можно причислить к недостаткам. Так, полимеразная цепная реакция является сверхчувствительным способом диагностики, который может давать ложно положительные результаты.
Например, если недостаточно обработали оборудование, пипетку или тару, в которую помещают биологический материал, и в ней остался минимальный след ДНК какого-либо микроорганизма, при анализе ДНК размножится и заключение будет неверным.
Поэтому специалисты рекомендуют обязательно пересдавать биологический материал, особенно при очень негативном результате, и желательно в другой клинике. Также не стоит приступать к лечению, имея лишь анализ из лаборатории на руках, нужно обязательно проконсультироваться с врачом.
Подготовка к исследованию на ИППП
Любое лабораторное исследование требует исключить факторы, которые могут негативным образом сказаться на результате. К таким факторам относят:
- Прием лекарственных препаратов. Лекарства могут различным образом влиять на результаты исследования и вызывать непредсказуемые итоги. Нужно сообщить врачу по возможности прекратить принимать лекарства.
- Употребление алкоголя накануне сдачи материала.
- Физические и эмоциональные перегрузки.
- Приемы пищи.
Таким образом, чтобы правильно сдать кровь или мазок, необходимо:
- Отказаться от приема лекарств, не начинать заниматься самолечением.
- Кровь сдавать натощак.
- Собирать первую порцию мочи, доставить ее в течение 2 часов.
- Перед сдачей мазка гигиенические процедуры запрещены, не надо делать спринцеваний, нельзя использовать крема и свечи.
- Женщинам нельзя сдавать мазок сразу после ручного бимануального исследования.
- Отказаться от курения и алкоголя.
Если врачу необходим в результате возбудитель урогенитального воспалительного процесса, то пациенту рекомендуется перед сдачей мазка не мочиться в течение 3 часов. А вечером перед сдачей анализа нельзя мыть половые органы.
Не проводят лабораторную диагностику мазков у женщин во время менструации. Если у пациентки начались месячные, то сдать анализ можно только на 2 сутки после окончания кровянистых выделений.
Забор материала для исследования
Забор материала осуществляет несколькими методами, все зависит от вида инфекции. Для выявления ЗППП берут мазок у женщин из влагалища, шейки матки и уретрального канала, у мужчин из уретры.
Для взятия мазка женщина размещается на гинекологическом кресле. Во влагалище вводят стерильное гинекологическое зеркало. Гинеколог при помощи ватного тампона осуществляет соскоб со стенки влагалища и с шейки матки, который хранят в физиологическом растворе в холодильнике.
У мужчин мазок берут из цервикального канала. Врач использует ватный тампон, которые вводят в уретру. Собранный биологический материал также размещают в физиологическом растворе и в холодильнике. Затем материалы отправляются в лабораторию для дальнейшего исследования.
Кроме мазка для диагностики ИППП может быть исследована моча пациента.
Но этот метод является нежелательным, так как трудно добиться от пациента сбора идеального материала. Не стоит забывать, что в воздухе находятся частички слюны, пыль, в том числе и частицы ДНК микроорганизмов. В лаборатории постоянно проводят кварцевание и обработку помещения антисептиками, поэтому вероятность заражения образца извне минимальна.
Для ПЦР анализа можно использовать и кровь пациента. Обычно таким способом диагностируют герпес и цитомегаловирус, гепатит, ВИЧ. Образцы крови берут из пальца или из вены.
Полимеразную цепную реакцию секрета простаты проводят мужчинам, если имеется простатит и есть подозрение на наличие специфической инфекции. Для взятие сока простаты проводят массаж предстательной железы через прямую кишку, в процессы которого и происходит выделение нескольких капель биологической жидкости. ПЦР спермы сдают при бесплодии и эректильной дисфункции, так как есть подозрение на наличии инфекции в яичках.
Как проходит диагностика
ПЦР анализ проводят в специальном приборе, которые нагревает и охлаждает образцы генетического материала, он называется амплификатор. Чтобы начать исследования, из полученного биоматериала выделяют молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), они содержатся почти во всех клетках организма.
В процессе исследования необходимо амплифицировать (размножить) ДНК матрицу методом репликации (копирования участка), для этого используются праймеры ( короткие фрагменты ДНК, которые необходимы для соединение цепочек ДНК), ДНК-полимеразу (фермент) и другие необходимые компоненты, в частности буферный раствор, ионы магния и др.
В процессе подготовки материала к исследованию много раз двойную матрицу ДНК нагревают примерно до 95°C, чтобы разрушить водородные с вязи. Матрицы распадаются, затем температуру снижают до, чтобы праймер связался с каждой одноцепочной матрицей. Температурный режим зависит от используемых праймеров.
Если праймер прикрепился к цепочке ДНК и она размножилась, значит результат анализа положительный. Лаборант сделает вывод, что исследуемый возбудитель в организме обнаружен. Для каждого микроорганизма используют специальные праймеры.
Чтобы визуализировать изменения, при помощи фермента ДНК-полимеразы происходит копирование матрицы. Весь этот процесс повторяют от 20 до 35 раз. Когда появилось достаточное количество цепочек ДНК, производят их наращивание при необходимости, чтобы достроить одноцепочные фрагменты. В результате лаборант может визуально оценить результаты и составить заключение.
Какие инфекции выявляет комплекс ПЦР 12
В современных лабораториях пациенты могут пройти специальный комплексный анализ на ИППП, который называется ПЦР 12. Он позволяет обследоваться на 12 половых инфекций. Для исследования берут мазки из влагалища, шейки матки, уретры. Как правило, врач выбирает наиболее пораженную область.
Анализ ПЦР 12 поможет выявить следующие инфекции:
- ВПГ (герпес 1 и 2 типа);
- ВПЧ (штаммы нужно уточнить в лаборатории);
- Хламидии;
- Микоплазма;
- Уреаплазма;
- Гонококк;
- Гарднерелла;
- Трихомонада;
- Кандида (вызывает кандидоз или молочницу);
- Цитомегаловирус;
- Мононуклеоз;
- ВИЧ.
Результаты исследования можно получить на следующей день или через день после сдачи биологического материала. Как правило, длительность исследования зависит от загруженности лаборатории.
Расшифровка результатов анализа на ИППП
Результат анализа может быть положительным или отрицательным, поэтому каких-либо норм не существует.
Если в биологическом образце есть хотя бы минимальные следы патогенного микроорганизма, эта часть ДНК размножится и результат анализа будет положительным.
После получение результатов на руки пациенту настоятельно рекомендуется обратиться к врачу, а не пытаться самостоятельно диагностировать заболевание и лечить его. Дело в том, что даже если возбудитель обнаружен, это не значит, что обязательно нужно пить таблетки, особенно антибиотики.
Так, гарднереллу относят к условно-патогенным микробом. Ее нахождение во влагалище не значит, что нужно обязательно лечиться, тем более, если нет воспаления. Похожим образом дела обстоят и при обнаружении микоплазмы и уреаплазмы. Если никаких симптомов нет, достаточно укреплять иммунитет и регулярно обследоваться.
Герпес и ВПЧ — это вирусы, которыми заражены практически все люди на планете Земля. Таким образом, анализ на ПЦР может показать наличие вируса, но лечение пациенту не потребуется, если микроорганизм не вызывает появление высыпаний и других симптомов воспалительного процесса.
С другой стороны, если обнаружены трихомонады, гонококки, спирохеты, то нужно повторить анализ и быстрее приступать к лечению. Потому что терапию этих инфекций лучше начинать на ранней стадии, дабы избежать тяжелых осложнений — инфицирования внутренних органов, развития спаек и бесплодия, сепсиса и тд.
Инфекционный мононуклеоз — это очень заразное заболевание. Если его обнаружили, то пациента необходимо госпитализировать в инфекционный стационар. А при обнаружении ВИЧ пациенту требуется срочное обследование и специфическое лечение. Если не начать его вовремя, вероятно развитие осложнений и гибель больного.
Заключение
Полимеразная цепная реакция — это самый эффективный анализ на скрытые инфекции и ЗППП, который сейчас существует. Если есть подозрения, что пациент заразился ИППП, обследование нужно пройти в обязательном порядке. ПЦР диагностика являются доступным исследованием, стоимость которого варьируется от 500 до 2000 рублей, в зависимости от объема.
Положительный результата анализа — повод обследоваться у врача и начать лечение. Нужно помнить, чем раньше начинается терапия ИППП, тем больше шансов навсегда избавиться от патогенного микроба и забыть о неприятных симптомах заболевания.
ТОП-5 проверенных клиник венерологии
- МедЦентрСервис (18 филиалов)
8 (495) 324-88-22- СМ-Клиника (13 филиалов)
8 (495) 292-63-14- Бест Клиник (3 филиала)
8 (495) 023-33-00- Академия здоровья
8 (495) 162-57-77- Платный медцентр дерматологии и венерологии
8 (495) 532-66-57